CD3/CD28的相关单克隆抗体

CD（Cluster of Differentiation）分子作为在细胞表面的提供靶点的免疫分型表型分子，在T细胞的免疫响应过程中通常以受体或配体的身份存在，通常是一个细胞内信号系统的开端。今天我们要说的CD3和CD28就是CD分子大家庭中的一员。

首先是CD3，作为一个与TCR（T细胞受体）有关的蛋白复合体，CD3能够与TCR一起激活杀伤T细胞（CD8+ naive T cells）以及辅助T细胞（CD4+ naive T cells）。CD3是由四个不同的链组成的，在哺乳动物中共包含1279个CD3γ链，一个CD3δ 链以及两个CD3ε 链。其与TCR具体的组成方式可参照图1，CD3与TCR以及ζ链共同组成TCR复合体。

同时在胞内的CD3γ，CD3δ，CD3ε的尾部都各包含了一个保守的基序，它的名字叫做免疫受体酪氨酸激活基序（ITAM），而在单条ζ链的尾部则包含了三个ITAM。免疫细胞活化相关受体胞浆区所共有的以酪氨酸残基为基础的氨基酸基序，其中酪氨酸是蛋白激酶磷酸化位点，被磷酸化后，与下游信号分子（ZAP70（Zeta asscoiated protein））结合，导致细胞活化。

再来说说CD28，CD28是表达在T细胞表面能够提供共刺激信号的蛋白质，对T细胞的活化与生存息息相关。同时作为协同共刺激分子CD80(B7.1)和CD86(B7.2)的受体分子，在抗原呈递细胞(APC)表面表达CD80与CD86后与CD28相互作用结合，从而将已经被CD3分子传递的信号激活后的T细胞刺激使其增殖并分泌相关的白细胞介素和其他细胞因子，具体的三维构象可参照图2。

对近些年国内的研究进行总结和整理，我们可以发现CD3和CD28的协同免疫性，通常是研究人员的一个关键点，其中将CD3单抗与CD28单抗联用可以促进一些免疫细胞的增殖同时提高免疫细胞对肿瘤的杀伤能力，不但兼具T淋巴细胞的抗瘤活性同时保留了NK细胞的非MHC限制性的对肿瘤细胞的杀伤作用。比如在2006年总医院输血科由骆群等人开展了抗CD28抗体协同刺激增强抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞并降低TGF-β(肿瘤生长因子beta)的表达的工作，该项工作通过利用抗CD28抗体模拟第二信号协同抗CD3抗体在体外对外周血淋巴细胞进行活化扩增用H-TdR掺入法测定抗体，结果显示单独的抗CD28抗体对外周血单核细胞没有明显激活活性，但是在抗CD28抗体的协同作用下，抗CD3抗体的激活时间明显提高。同时抗CD3抗体刺激T淋巴细胞后，能够介导T淋巴细胞分泌TGF-β，而这种分子在介导体内长期免疫耐受的过程起到关键作用。

再有在2016年2月由郑州大学附属医院李玉等人就开展了关于CD3和CD28单克隆抗体联合作用对细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）及其亚群增殖及功能影响的相关工作，通过研究发现CD3/CD28联合作用可以促进干扰素γ（IFN-γ）,肿瘤坏死因子α（TNF-α）的分泌，同时利用磁珠分选检测各个亚群的细胞因子分泌情况发现CD3/CD28联合作用可以促进CD8⁺细胞分泌IFN-γ，促进CD56⁺细胞释放IL-2，TNF-α。

这样围绕CD3/CD28的免疫细胞研究不仅能够直接对抗原呈递过程进行探索，同时在激活T细胞过程前后其所分泌的各种因子分子做后续的机制构建也是不错的实验思路选择。

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